BL21-CodonPlus 感受態(tài)細胞
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Agilent BL21-CodonPlus 感受態(tài)細胞通過克服密碼子偏好性,顯著提高蛋白質在大腸桿菌中的表達量。某些密碼子在大腸桿菌中一般極少表達,若使其強制性高表達,就會導致大腸桿菌內部的tRNA庫被耗竭,從而發(fā)生密碼子偏好性。這種情況通常會導致蛋白合成減少、多肽鏈提前終止,或表達蛋白質中的氨基酸錯誤摻入。BL21-CodonPlus 感受態(tài)細胞來源于安捷倫的高性能 BL21-Gold 感受態(tài)細胞系。這些細胞能實現(xiàn)異源蛋白質在大腸桿菌中的高效高水平表達。
克服密碼子偏好性后,無需進行定點突變或在真核生物表達系統(tǒng)中表達蛋白,因此節(jié)省了時間和人力。L21-CodonPlus 感受態(tài)細胞來源于 BL21-Gold 細胞,該細胞經過設計含有基因的額外拷貝,這些基因可編碼這些罕見大腸桿菌密碼子的 tRNA。增加這些 tRNA 后,有助于在 BL21-CodonPlus 感受態(tài)細胞中高水平表達多種異源重組基因。大腸桿菌中異源蛋白質的高效生成常常受到某些 tRNA 稀有性的限制,而這些 tRNA 在產生異源蛋白質的有機體中很豐富。強制性高水平表達異源蛋白質會耗盡稀有 tRNA 庫,阻礙翻譯。
BL21-CodonPlus 感受態(tài)細胞還具有安捷倫最高效感受態(tài)細胞株 XL10-Gold 中存在的 Hte 表型。Hte 表型的存在提高了細胞的轉化效率。此外,編碼核酸內切酶 I (endA) 的基因已在這些細胞中去活,這種酶能夠快速降解由多數(shù) miniprep 步驟分離的質粒 DNA。這兩個特征實現(xiàn)了多種蛋白質表達構造子的直接克隆。
克服密碼子偏好性后,無需進行定點突變或在真核生物表達系統(tǒng)中表達蛋白,因此節(jié)省了時間和人力。L21-CodonPlus 感受態(tài)細胞來源于 BL21-Gold 細胞,該細胞經過設計含有基因的額外拷貝,這些基因可編碼這些罕見大腸桿菌密碼子的 tRNA。增加這些 tRNA 后,有助于在 BL21-CodonPlus 感受態(tài)細胞中高水平表達多種異源重組基因。大腸桿菌中異源蛋白質的高效生成常常受到某些 tRNA 稀有性的限制,而這些 tRNA 在產生異源蛋白質的有機體中很豐富。強制性高水平表達異源蛋白質會耗盡稀有 tRNA 庫,阻礙翻譯。
BL21-CodonPlus 感受態(tài)細胞還具有安捷倫最高效感受態(tài)細胞株 XL10-Gold 中存在的 Hte 表型。Hte 表型的存在提高了細胞的轉化效率。此外,編碼核酸內切酶 I (endA) 的基因已在這些細胞中去活,這種酶能夠快速降解由多數(shù) miniprep 步驟分離的質粒 DNA。這兩個特征實現(xiàn)了多種蛋白質表達構造子的直接克隆。
僅限研究使用。不可用于診斷目的。
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